BIOTECNOLOGÍA: 2.1.6 Preparación de los medios de Cultivo

2.1.6 Preparación de los medios de Cultivo

Entre los factores más importantes a tener en cuenta para lograr la respuesta morfológica deseada en un cultivo de tejido in vitro, es la composición del medio de cultivo. El medio de cultivo está conformado por macro y micronutrientes esenciales para la supervivencia de la planta, nutrientes (hidratos de carbono, vitaminas), agentes reguladores del crecimiento y hormonas vegetales, que ayudarán a obtener, una planta completa, o un órgano vegetal en particular, a partir del explante elegido (en condiciones de asepsia) y algún agente gelificante.

Ejemplo: Preparar 400 mL De Un Medio MS (1x), partiendo de soluciones concentradas de sales y orgánicos a 100x, añadiendo 30g / L de sacarosa y 2.7g / L de Phytagel. Añadiendo 0.5 ppm / L De A.N.A a una concentración de 1000 ppm.

Este mismo procedimiento es el que se lleva acabo para todas ( 2) solución de sulfatos, 3) solución de quelatos 4) solución de Po, Bo y Mo, 5) solución de halógenos y 6) solución de orgánicos) las soluciones por lo que no es necesario repetirlo.

7) A.N.A

V2 = V1.C1/C2

V2 = (400 mL)(0.5 ppm)

1000ppm

V2 = 0.2 mL

8) PHYTAGEL

(2.7 g)(400 mL)/ 1000 mL = 1.08 g